PCR แบบเรียลไทม์เทียบกับ LAMP: เหตุใด PCR จึงเป็นผู้นำในการทดสอบความแม่นยำ

🔬 PCR แบบเรียลไทม์เทียบกับ LAMP: เหตุใด PCR จึงเป็นผู้นำในการทดสอบความแม่นยำ

ในการวินิจฉัยทางโมเลกุล แม้ว่า LAMP จะนำเสนอความเรียบง่าย PCR โดดเด่นในเรื่องความแม่นยำที่สำคัญในทางคลินิกและการวิจัย. ความแตกต่างมีดังนี้:

1. ความไว

PCR ตรวจพบได้น้อยถึง 1–10 สำเนา/μL (ความไวต่อโมเลกุลเดี่ยว) ซึ่งมีความไวมากกว่า LAMP 10 เท่าซึ่งตรวจจับได้ 10–100 สำเนา/μL ซึ่งจำเป็นสำหรับเป้าหมายที่หายาก เช่น เชื้อก่อโรคในระยะเริ่มต้นหรือยีนที่มีปริมาณน้อย

2. การวัดปริมาณ

PCR ช่วยให้สามารถวัดปริมาณได้อย่างแม่นยำในช่วง 10¹–10¹⁰ สำเนา ให้ข้อมูลปริมาณไวรัส การแสดงออกของยีน หรือข้อมูลโรคที่เหลืออยู่อย่างแม่นยำ ผลลัพธ์กึ่งเชิงปริมาณของ LAMP (ความคลาดเคลื่อน ±40%) ไม่สามารถตอบสนองความต้องการสำหรับการใช้งาน เช่น การติดตาม MRD ของมะเร็ง หรือการประเมินประสิทธิภาพของยา

3. การมัลติเพล็กซ์

PCR ทดสอบเป้าหมาย 3-5 เป้าหมายในปฏิกิริยาเดียว (เช่น การตรวจกลุ่มเชื้อก่อโรคทางเดินหายใจ การคัดกรองไบโอมาร์กเกอร์มะเร็ง) ช่วยลดขั้นตอนการทำงานที่มีปริมาณงานสูง การออกแบบไพรเมอร์ที่ซับซ้อนของ LAMP (ต้องใช้ไพรเมอร์ 6 ตัว) จำกัดให้เหลือเพียง 1-2 เป้าหมาย ซึ่งจำกัดประสิทธิภาพในการทดสอบแบบหลายสารวิเคราะห์

4. ความน่าเชื่อถือ

ระบบป้องกันการปนเปื้อนในตัว (เอนไซม์ UNG + dUTP) และประสิทธิภาพที่แข็งแกร่งในการทดสอบตัวอย่างที่ท้าทาย (เสมหะ เนื้อเยื่อ FFPE และเลือด) ช่วยให้มั่นใจได้ถึงผลลัพธ์ที่สม่ำเสมอ LAMP มีแนวโน้มที่จะเกิดการปนเปื้อนในละอองลอย และอาจสูญเสียความไว 30% ในตัวอย่างที่ถูกยับยั้ง ซึ่งจำเป็นต้องได้รับการจัดการอย่างเข้มงวด

📌 เลือก PCR สำหรับ

✅ การวัดปริมาณที่แม่นยำ (ปริมาณไวรัส, การตอบสนองต่อยีนบำบัด, การแสดงออกของยีน)
✅ การฉายแบบมัลติเพล็กซ์ (เครื่องหมายมะเร็ง แผงเชื้อโรค แผงพันธุกรรม)
✅ ตัวอย่างที่ซับซ้อน (ของเหลวทางคลินิก เนื้อเยื่อที่เก็บถาวร ตัวอย่างสิ่งแวดล้อม)

LAMP ทำงานได้กับสถานการณ์ที่มีทรัพยากรจำกัด แต่ ความแม่นยำ ความสามารถในการปรับขนาด และสถานะมาตรฐานทองคำของ PCR ทำให้ไม่มีใครเทียบได้ในการวินิจฉัยที่แม่นยำ.

#การวินิจฉัยระดับโมเลกุล #ยาแม่นยำ #เครื่องมือวิจัย #RealTimePCR #เทคโนโลยีชีวภาพ